31/08/2025
Électrophorèse de l'hémoglobine
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1. Objectif
L'objectif de l'électrophorèse de l'hémoglobine était de séparer et d'identifier les différents types d'hémoglobine dans le sang afin de détecter des anomalies telles que la drépanocytose, la thalassémie ou d'autres hémoglobinopathies.
2. Principe
Le principe reposait sur le mouvement des molécules d'hémoglobine dans un champ électrique. Comme les différentes hémoglobines portent des charges différentes à un pH donné, elles migrent à des vitesses différentes sur un support (tel que l'acétate de cellulose ou le gel d'agar). Cette séparation permettait d'identifier les types d'hémoglobine anormaux et normaux.
3. Matériel
Échantillon de sang du patient (tube EDTA)
Solution de préparation de l'hémolysat
Tampon d'électrophorèse
Appareil d'électrophorèse (alimentation, plateau de gel, électrodes)
Bandes de gel d'acétate de cellulose ou d'agarose
Solutions de coloration et de décoloration
Échantillons d'hémoglobine témoins
4. Procédure (microscopique / en laboratoire)
1. L'échantillon de sang a été prélevé et les globules rouges ont été lysés pour préparer un hémolysat.
2. Une bande d'acétate de cellulose a été trempée dans le tampon et placée sur la chambre d'électrophorèse.
3. L'hémolysat a été appliqué en petites gouttes sur la bandelette avec les échantillons témoins.
4. L'électrophorèse a été réalisée à tension constante pendant une durée déterminée.
5. Après séparation, la bandelette a été colorée pour visualiser les bandes d'hémoglobine.
6. Le profil de migration a été comparé à celui des témoins standards.
5. Résultat
Un résultat normal a montré des bandes claires d'HbA (majeure), avec de petites fractions d'HbA2 et d'HbF.
Les résultats anormaux ont montré des bandes supplémentaires ou manquantes, telles que l'HbS, l'HbC, ou une augmentation de l'HbF selon la maladie.
6. Utilisations
Diagnostiquer la drépanocytose et son trait
Détecter les syndromes thalassémiques
Évaluer une anémie ou une hémolyse inexpliquée
Surveiller les troubles de l'hémoglobine dans les familles et dans le cadre des programmes de dépistage néonatal