مختبـر إيليـاء التخصصـي

18/09/2017

28/10/2015

اسهل وادق طريقة لتحليل البول Urine analysis
إغلاق

البول سائل رائق شفاف لونه يميل إلى الصفرة يفرزه الجسم عن طريق الكليتين الموجودة في الخلف بجوار العمود الفقري و أسفل القفص الصدري

طريقة تحليل البول الروتيني في البداية يجب مراعاة الأتي:

· يجب أخذ عينة البول المراد فحصها في وعاء زجاجي نظيف مع كتابة اسم صاحب العينة علي الوعاء أو الرقم الكودي إن وجد.
· تؤخذ عينة البول من منتصف مجري البول بعد عمل تطهير لمخرج البول.
· إذا كانت عينة البول مطلوبة للفحص البكتريولوجي يجب أن تؤخذ العينة في وعاء زجاجي معقم.
· يجب فحص عينة البول فور أخذها وإذا تطلب الاحتفاظ بعينة البول لفترة أطول فيجب حفظها في ثلاجة ولا تزيد المدة عن 24 ساعة ولا تترك أكثر من ساعة في درجة حرارة الغرفة.
· يفضل تحليل البول فى الصباح الباكر، حيث يكون البول أكثر تركيزا، و يفضل أيضا ترك أول جزء من البول ثم اخذ العينة بعد ذلك في الأنبوب أو الكأس المعد خصيصا لذلك = و ليس اى زجاجه مثلا = ثم ترك الجزء الأخير من البول.
· كثيراً ما يطلب تحليل بول 24 ساعة لإيجاد كميات العناصر المكونة له. في هذه الحالة يترك بول الصباح ثم يجمع البول طول النهار والليل حتى صباح اليوم التالى في زجاجة بها المادة الحافظة ثم يخلط جيداً وتؤخذ منه عينه للتحليل المطلوب ويوضع بول صباح اليوم التالي في زجاجة بمفردها بدون المادة الحافظة ثم يفحص ميكروسكوبياً.
· التأكد من نظافة الأنابيب والأدوات المستخدمة.
· إعداد الأدوات قبل بدء العمل حتى لا يكون عدم استكمالها مضيعه للوقت.

المواد الحافظة
الثيمول
مقدار يتراوح بين 5 الى 10 سم تقريباً
حامض الهيدروكلوريك
2 ـ 5 سم تقريباً
حامض اليوريك
3 ـ 5 جرام تقريباً
الكلوروفورم
3 ـ 6 سم تقريباً

تحليل البول يشمل التحليل الفيزيائي / التحليل الكيميائي / التحليل الميكروسكوبي
الفحص الطبيعي:
تكون كميه البول قليلة فى حالات الجفاف نتيجة إسهال أو قئ و قد تكون كثيرة كما فى حالات مرض السكر و اللون الأحمر قد يكون بسبب نزول دم مع البول و قد يكون بسبب أكل البنجر أو بسبب تناول دواء معين، و درجه اللون تكون أغمق فى الصباح و أيضا نقص السوائل بالجسم

اللون
أصفر
المظهر
رائق شفاف
التفاعل
حمضي
الكثافة النوعية
1015 – 1025

طريقة قياس كثافة البول:
· بواسطة مقياس كثافة البول (Urinometer) وهو مدرج من 1000 حتي 1060 عند درجة حرارة(20) درجة مئوية.
· ضع حوالي 40 مل3 من البول في مخبار مدرج وضع مقياس كثافة البول بلطف.
· انتظر حتي يستقر وضعه علي ألا يكون ملامسا لجدار أو قاع المخبار.
· خذ القراءة الموجودة علي مقياس الكثافة الملاصقة للسطح العلوي للبول.
· عدل الكثافة النوعية حسب درجة حرارة الغرفة كالتالي: أضــف إلي القراءة (1) لكل 3 ْ م زيادة عن درجة 20 ْم والعكس صحيح بمعني اطرح (1) لكل ( 3 ْم) تقل عن درجة الحرارة (20 ْم)
مثال: عند درجة الحرارة 26 ْم كانت الكثافة النوعية للبول (1021 ) تجد أن درجة الحرارة تزيد بمقدار 6 ْم) إذا بعد تعديلا لكثافة النوعية تصبح (1023)

الفحص الكيميائي:
بعض الأملاح تذوب فى الوسط القلوي و بعضها فى الوسط الحمضى ، و مع اختلاف درجه الحموضة قد تترسب بعض الأملاح مكونه حصوات فى البول ، لاحظ إن الطعام الذى يكثر فيه البروتينات يؤدى الى حموضة البول بينما الخضروات و الفاكهة تجعله قلويا ، لذلك قد يصف الطبيب اكلا خاصا أو يمنع بعضه حسب نوع الحصوات

الزلال:

طريقة التجمد بالحرارة:

يملأ ثلثا أنبوبة اختبار من البول الرائق
· إذا كان البول غير رائق يتم ترشيحه أو تدويره في السنترفيوج.
· يسخن الجزء العلوي من الأنبوبة من 1 – 3 سم حتي الغليان ويستمر الغليان لمدة دقيقتين.
· إذا تكونت عتامة بيضاء بالتسخيـن أضف 3 – 5 نقط محلول حامض الخليك المخفف 3% علي جانب الأنبوبـــــة إذا لم تختفي العتامـة دل ذلك علي وجود زلال وإذا اختفت العتامة دل ذلك علي وجـــود أملاح الفوسفــات عديمــــــــــــة الشكل (Amorphous Phosphate)

طريقة شرائط البول:
ويتم ذلك بغمس الشريط في البول وإخراجه بسرعة ومسحه علي حافة الوعاء لإزالة بقايا البول العالقة علي الشريط ويتم قراءته خلال نصف دقيقة إلي دقيقة ويتم مقارنة اللون علي الشريط بالألوان القياسية الموجودة علي علبة الشرائط.

الجلوكوز:

اختبار بندكت:
يوضع 5 مل3 من محلول بندكت في أنبوبة اختبار ويضاف 8 نقط من البول ويغلي علي لهب بنزن لمدة دقيقتين، اترك الأنبوبة بمحتوياتها لتبرد عند درجة حرارة الغرفة، إذا تغير اللون الأزرق دل ذلك علي وجود السكر بالـبول وتكتب النتيجة حسب
درجات اللون كمية الجلوكوز

الأزرق
الأخضر
الأخضر يصاحبه راسب اصفر
أصفر إلي أصفر غامق
برتقالي إلي أحمر
بني
سلبي
أثر أو نسبة قليلة جدا
+
++
+++
++++

ملحوظة عامة:
يوضع في الاعتبار أنه يوجد بعض مواد في البول قد تغير لون محلول البندكت مثل حمض الاسكوربيك ( فيتامين ج)والأسبرين وسكر اللبن وخاصة بول السيدات الحوامل.

طريقة استخدا مشرائط الجلوكوز:
يتم ذلك بغمس طرف الشريط في البول وإخراجه بسرعة ومسح بقايا البول من عليه ويترك من نصف دقيقة إلي دقيقة ويتم مقارنة اللون علي الشريط بالألوان القياسية الموجودة علي علبة الشريط الاحتياطات الواجب مراعاتها عند استخدام شرائط الغمس ( للجلوكوز)

الشرائط المصنعة لإجراء الاختبارات المختلفة علي عينات البول عبارة عن شرائط بلاستك بها مناطق لكل فحص تحتوي علي مواد كيميائية جافة مخصصة للتفاعل مع المادة المطلوب فحصها – يتكون لون مميز في الحالات السلبية لا يتغير لون منطقة ( مربع) الاختبار.

1ـ الرطوبة ودرجات الحرارة العالية تؤثر علي كفاءة الاختبارات لذا يجب حفظ العبوات في مكان بارد جاف وليس في الثلاجة .
2ـ تجري الفحوص في درجة حرارة الغرفة ( خاصة الاختبارات التي تعتمد علي نشاط الإنزيمات) .
3ـ لمس الاختبارات يؤثر علي كفاءة التفاعل.
4ـ تجنب وضع الشرائط علي البنش مباشرة ويجب وضعها علي ورقة نظيفة جافة وكذلك لا تستعمل الشرائط في وجود أبخرة من الأحماض والقلويات المركزة.
5ـ تغير لون الكاشف يدل علي أنها فقدت حساسيتها.
6ـ تأكد من وصول مناطق الاختبار إلي البول وتجنب بقاء الشريط فترة طويلة ملامسا للبول.

أملاح الصفراء:

اختبارهاي(Hay's Test ) :
رش كمية قليلة من زهر الكبريت المسحوق علي سطح البول في كأس ..... إذا رسب زهر الكبريت إلي القاع دل ذلك علي وجود أملاح الصفراء.
صبغات الصفراء ( البليرويين)
اختبار جملين ( Gemelin's Test ):
يوضع 10 مل بول في أنبوبة اختبار ويضاف 4 مل من محلول كلوريد الباريوم بتركيز 10% - ترج الأنبوبة-
· يرشح البول ( كلوريد الباريوم يرسب البليرويين )
· تفرد ورق الترشيح علي ورقة أخري وتترك لتجف
· توضع بضع نقاط حمض نيتريك مركز، ظهور ألوان ( أحمر – بنفسجي - أخضر ) يدل علي وجود بيليروبين.
اختبار اليود (Iodine Test):
ضع في أنبوبة اختبار حوالي 4 مل بول ثم ضع علي جدار الأنبوبة 4 نقط من محلول اليود الكحولي ( يذاب 0.5 جم بللورات يود في 100 مل ايثانول) ظهور حلقة خضراء عند اتصال المحلولين يدل علي وجود أصباغ الصفراء.

الفحص الميكروسكوبي:

1ـ رج الكأس أو الكوب الذي به عينة البول جيدا حتى يصبح متجانسا ويشتمل علي الرواسب في قاع الكأس أو الكوب و بذلك تصبح العينة ممثلة جيدا بكل مكونات البول.
2ـ ضع كمية مناسبة في أنبوبة سنترفيوج عليها رقم العينة.
3ـ ضع الأنبوبة في السنترفيوج وضع أنبوبة أخري في الخانة المقابلة بها نفسالكمية من بول مريض آخر أو من الماء ، وذلك حتى يتم التوازن عند البدء في تشغيل جهاز السنترفيوج.
4ـ أضبط جهاز السنترفيوج علي السرعة المناسبة للطرد المركزي وهي غالبا ما تكون بين 1000 إلي 1500 لفه في الدقيقة ولمدة لا تتعدي الخمس دقائق.
5ـ أغلق الجهاز ودعه حتى يقف تماما عن الدوران.
6ـ أنزع الأنبوبتين ( أو أي عدد موجود بالجهاز).
7ـ فرغ محتويات الأنبوبة التي بها عينة البول برفق في الكأس أو الكوب الخاص بالعينة وأحتفظ بالنقطة الأخيرة والتي تحتوي علي الرواسب الموجودة بالبول.
8ـ ضع هذه النقطة علي شريحة ميكروسكوب نظيفة ثم أفردها بطرف الأنبوبة ثم قم بتغطيتها بغطاء شريحة ميكروسكوب (Cover) .
9ـ ضع الشريحة علي مسرح الميكروسكوب.
10ـ تأكد أن الميكروسكوب به إضاءة كافية تسمح بوضوح الرؤية .
11ـ تأكد أن العدسات العينية والشيئية نظيفة وكذلك المسرح .
12ـ ضع المكثف في وضعه السفلي والحجاب الحاجز مفتوح .
13ـ يجب أن يبدأ الفحص للعينة بالعدسة الشيئية قوة تكبير "X 10 "Low Power وذلك حتى يتم مسح الشريحة كاملة بسهولة وبسرعة وعند وجود أشياء يراد التدقيق في فحصها يتم التركيز عليها بالعدسة الشيئية قوة تكبير "X 40 "High Power

07/09/2015

دراسة الصفات المزرعية للبكتيريا Bacterial Cultural Characteristic
تعتبر الخواص المزرعية من أهم الصفات التي تدرس للتعرف على الأنواع المختلفة من البكتيريا وتصنيفها وتشمل الدراسة وصفا دقيق للنمو البكتيري على المستنبات الصلبة والسائلة كما يشمل وصفا للمستعمرات الفردية وتتم وصف المستعمرات من حيث:
-1شكل المستعمرات البكتيرية: يمكن للمستعمرات البكتيريا على المستنباتات الصلبة أن تأخذ أحد الأشكال التالية:
دائرية
مستديرة ذات نتوء وحافة مروحية الشكل،مستديرة ذات حافة بارزة،دوائر متحدة المركز،غير منتظمة منتشرة
خيطية،جذرية،خيطانية
2- ارتفاع المستعمرات البكتيرية: يمكن ان يكون ارتفاع المستعمرات البكتيرية على المزارع الصلبة بأحد الأشكال التالية:
- محدبة-بارزة- مسطحة- تلية- مرتفعة الوسط- قبية- هيئة فوهة بركان- متخللة للمستنبت.
دراسة الصفات المزرعية للبكتيريا Bacterial Cultural Characteristic
3- شكل حافة المستعمرة البكتيرية:
-مموجة- كاملة- متفرعة- مهدبة- مسننة- خيطية-صوفية
4- شكل سطح المستعمرة البكتيرية:
- ناعم (أملس)- خشن
5- حجم المستعمرة البكتيرية: يمكن قياسه باللميليمتر أو(الحكم بالنظر مقارنة بالمستعمرات الأخرى (صغيرة، متوسطة، كبيرة)
6- الصفات الضوئية والشفافية للمستعمرة
- شفافة
- نصف شفافة
- معتمة
7- قوام المستعمرة البكتيرية وتوصف بأنها: (نقوم بهذا الإختبار كخطوة أخيرة)
- لزجة (يعلق النمو البكتيري بالإبرة)
- غشائية (تزول تماما بالإبرة)
- هشة (تتكسر بمجرد لمس الإبرة) - 8-إنتاج الصبغات:
ويشمل ذلك وصف ما اذا كانت المستعمرات البكتيرية ذات لون معين أو ان هناك صبغة ذات لون معين تغطي سطح المستنبت نتيجة لنمو ذلك النوع البكتيري.

9- كثافة النمو: لايوجد نمو، ضئيل، متوسط، غزير

10- الرائحة:
-إما ان يكون للنمو البكتيري رائحة شبيهة برائحة مادة أخرى معروفة.
-أو أن لا يكون لها رائحة

02/09/2015

البيئات culture media

هي الوسط الصناعي الذي تنمو وتتكاثر
عليه البكتريا لأنه يحتوي على المواد الغذائية اللازمة للميكروب والتفاعل
الهيدروجيني المناسب له ويضأ يحتوي على الأكسجين أو ثاني أكسيد الكربون ويحتوي أيضا
على الأحماض الأمينيه والأملاح المعدنية وكل ميكروب ينو ويتكاثر على مستنبت خاص به
حيث يحتوي على متطلباته

مثل:
1-Blood
Agar
2-Maconkey Agar
3-Chocolate agar
4-Cled Agar
5- ( salmonella shigella agar(S.S.A
6-Maconkey Agar. MA.
7-XLD agar

23/08/2015

مضادات التخثر ( موانع التجلط ) Anticoagulants

تستخدم مضادات التخثر في حالة استعمال عينات من البلازما أو الدم الكلي حسب ما تقتضيه التجربة وعليه يجب إضافة مضاد للتخثر إلى أنبوبة جمع الدم حال سحبه مباشرة وعادة يغلق جدار أنبوبة جمع الدم بمضاد التخثر ، وتجدر الإشارة إلى أن اختيار مضاد التخثر يجب أن يقوم على اعتبار أن هذا المضاد لن يؤثر على التحليل الكيميائي وهذه النقطة مهمة جدا . لأن مصادر التخثر هي مركبات كيميائية لأملاح بعض المعادن مثل الصوديوم والبوتاسيوم والليثيوم ، لذلك لا يمكن استخدام مضادات التخثر من أملاح الصوديوم والبوتاسيوم عندما يخص التحليل تعيين الإلكتروليتات كالصوديوم والبوتاسيوم لأن ذلك سوف يؤدي إلى خطأ إيجابي أكبر في نتائج التحليل ولكن في مثل هذه الحالة يمكن استخدام مضادات التخثر لليثيوم أو الأمونيوم .

أما في حالة تحليل الكالسيوم في الدم فلا يمكن استخدام أكزالات الصوديوم لأن هذا الملح سوف يزيل كل ما تحتويه العينة من الكالسيوم بترسيبه على شكل أكزالات الكالسيوم .

وكذلك تعمل مضادات التخثر على تثبيط فعالية بعض الإنزيمات ، مثل إنزيم الفوسفاتاز الحمضي Acid Phosphatase والفوسفاتاز القاعدي Alkaline Phosphatase وأنزيم نازعة الهيدروجين من لاكتات LDH أما أملاح فلوريد البوتاسيوم أو الصوديوم فتثبط فعالية إنزيم اليورياز بينما تنشط فعالية إنزيم الأميلاز ، كما تستطيع مضادات التخثر إفقاد الاختبار أهميته المرضية

هذه بعض أنواع المواد المخثرة للدم .

1 – الهيبارين Heparin

هو مادة مضادة للتخثر وهو من مكونات الدم الأساسية ولكنه يوجد بتركيز لا يكفي لمنع تخثر الدم ، ويتولد الهيبارين من خلايا الكبد فهو موجود بتركيز عالي في الكبد كما أنه موجود أيضا في الخلايا الرئوية وقد أمكن فصله وعزله بشكل ملح متبلور من مستخلص الكبد والرئة ويتميز عن غيره بكونه لا يتداخل معه أي اختبار من اختبارات التحليل الكيميائي ، والهيبارين عبارة عن ميكوتين عديد حمض الكبريتيك Muccoitin Polysulphouric – Acid وهو من السكريات المتعددة ويمكن الحصول عليه تجاريا في الوقت الحاضر من أملاح الصوديوم Sodium Heparin أو ملح البوتاسيوم Potassium Heparin أو ملح الليثيوم Lithium Heparin

يعمل الهيبارين كمضاد للثرومبين Antithrombin حيث يمنع نقل أو تحويل البروثرومبين Prothrombin إلى ثرومبين Thrombin وهكذا يمنع تكوين الفيبرين Fibrin إلى الفيبرينوجين Fibrinogen وتتم عملية التجلط على مرحلتين كالتالي :


Prothrombin Thrombplastic Activity Factor ► Thrombin

Fibrinogen Thrombin ► Fibrin (blood c**t)

ويحتاج الهيبارين إلى عامل مساعد Cofactor للقيام بعمله .

يضاف الهيبارين بنسبة 20% وحدة لكل ملليتر من الدم ، وبما أنه لا يذوب في الحال لذا فإن محلوله غالباً ما يستخدم ويجفف، علر جدران الأنبوبة ليكون في تماس مباشر مع الدم ومفعوله أفضل ما يمكن ، ولا تزال أسعاره المرتفعة ومفعوله المؤقت من معوقات استخدامه في المختبرات إذا ما قورن .بمضادات التخثر الأخرى ، ويحتوي هيبارين الصوديوم على ما لا يقل عن 110 وحدة / مجم ويستعمل عادة بتركيز حوالي 0.2 مجم / مل من الدم .

2 – اكزالات البوتاسيوم Potassium Oxalates

يعمل هذا المضاد على ترسيب أيونات الكالسيوم وبذلك يمنع تجلط الدم ويفضل استعماله لسهولة ذوبانه ، ونحتاج عادة إلى 10 – 20 مجم من إكزالات البوتاسيوم لمنع تجلط 10مل من الدم و 2 مجم لكل واحد مل من الدم ويستعمل هذا المحول عادة بتركيز 30% ويعاير إلى الرقم الهيدروجيني PH = 7.4 باضافة محلول هيدروكسيد البوتاسيوم أو محلول حمض الاكزاليك ومن الجدير بالذكر أن 0.1 مل من محلول إكزالات البوتاسيوم المحمر تكفي لمنع تخثر 10 مل من الدم.

3 - فلوريد الصوديوم Sodium Fluoride

يستعمل عادة كمادة حافظة من أجل تقدير الجلوكوز في الدم إلا أنه يستخدم كمضاد للتجلط (ضعيف ) ، وعندما يستخدم كمادة حافظة بالإضافة إلى وجود مانع للتجلط مثل اكزالات البوتاسيوم فأنه يكون مؤثر بتركيز حوالي 2 مجم / 1 مل من الدم ويبدأ تأثيره عن طريق تثبيط النظام الانزيمي المشترك في عملية Glycolysis الذي يؤدي إلى قلة تركيزه ، وتحضر الأنابيب الحاوية لهذا لهذا المزيج بإذابة 4 جم من كلوريد الصوديوم مع 12 جم من إكزالات البوتاسيوم في 200 مل من الماء ، توضع قطرة واحدة في كل أنبوب لكل 1 مل من الدم وتجفف الأنابيب بدرجة حرارة أقل من 100 م .

وكقاعدة عامة فإذ الفلوريد يجب ألا يستخدم عندما يكون جمع العينات من أجل تقديرات إنزيمية أو عندما يستخدم ككاشف Reagent في الاختبار (الطول الإنزيمية) مثل طريقة اليورياز Urease لتقدير اليوريا .

4 – إيثلين ثنائي الأمين رباعي حمض الخل
Ethylene Diamine Tetra Acetic Acid (EDTA)

يفضل استخدام هذا المضاد في اختبارات علم الدم Hematology بصورة خاصة حيث يعمل على المحافظة على المكونات الخلوية من التلف ويستخدم عادة بشكل ملح ثنائي الصوديوم أو ثنائي البوتاسيوم بتركيز يقارب من 1 - 2 مجم / مل من الدم وتعزى فعالية هذا االملح كمضاد للتخثر إلى قابليته للارتباط مع كالسيوم الدم وعزله كلياً عن القيام بدوره في عملية التخثر .

23/08/2015

من أفضل المواد المانعة لتجلط والمستخدمة في قسم علم أمراض الدم (Haematology) مادة الـ ( EDTA ) وهي عبارة عن Ethylene Diamine Tetra Acetic acid وتستخدم هذه المادة بالتحديد في الأنابيب الخاصة بتحليل صورة الدم الكامل الكامل ( CBC ).

توجد أيضا مواد أخرى من أهمها مادة سترات الصوديوم ( Sodium citrate ) والتي تستخدم في الأنابيب الخاصة بتحاليل التخثر الـ (Coagulation) وتحليل سرعة الترسيب ( ESR ) ومن المواد المانعة لتجلط أيضا المواد التالية:
1. مزيج من أكسلات الأمونيوم وأكسلات الصوديوم.
2. أكسلات الصوديوم (Sodium oxalate)
3 - الهيبارين ( Heparin ).
هذه المواد نادرا ما تستخدم في التحاليل الخاصة بقسم علم أمراض الدم.
عند استعمال المواد المانعة للتجلط يجب مراعاة ما يلي :
1. التأكد من عدم حدوث تجلط في الأنبوب.
2. نسبة المادة التي تمنع التجلط تكون محفوظة وثابتة وإلاّ أثرت على الخلايا.
3. عند استعمال المادة المانعة للتجلط في حالة بودرة فإنه يجب مزجها جيدا مع الدم.
4. عند إضافة أحد هذه المواد إلى الدم نحصل على البلازما.
في حالة عدم إضافة أي من هذه المواد المانعة للتجلط فإن الدم يتجلط ويعرف السائل الناتج بالمصل أو السيرم.
* المصل أو السيرم ( Serum ) عبارة عن البلازما ناقص عوامل التجلط ( Coagulation factors ) ومولد الفبرين (الفبرينوجين) الذي يستهلك أثناء تكون الجلطة الدموية.
* الشكل يوضح أنبوب عينة دم تحتوي على مانع للتجلط حيث تترسب في الأول كريات الدم الحمراء ويليها خلايا الدم البيضاء والصفائح الدموية Buffy coat وفي الأعلى تنفصل البلازما .

22/08/2015

[align=center]اختبار العد الكلي لمكونات الدم .. "CBC "Complete blood count[/align]
الهدف من الاختبار:

تقدير بعض مكونات الدم الأساسية , والتي بها نسب طبيعية إذا زادت أو نقصت هذه النسب عن المعدل الطبيعي , فإنها تشير إلى حالة مرضية.

ومن أهم المكونات التي يتم قياسها وتندرج تحت مسمى تحليل الـ CBC المكونات التالية:

1- عدد كريات الدم الحمراء .. "RBC .. "Red Blood Cells

* وأزدياد هذه الكريات مؤشر لمرض (زيادة انتاج كريات الدم الحمراء).. Polycythemia

وهذا الازدياد له نوعين من الاسباب:

أ- أسباب حقيقية :

1- أولية غير معروفة السبب Idiopathic
2- ثانوية ناتجة عن انخفاض في مستوى الأكسجين في الدم وهذا ناتج عن (السكن في المناطق المرتفعة/أمراض القلب/أمراض في الرئتين).
3- ثانوية ناتجة عن زيادة إفراز هرمون الأريثروبويتين وهذا ناتج عن (امراض في الكلى / امراض في الكبد).
4- وراثي كما في بعض العائلات.
5- نتيجة لاختلال في تركيب الهيموجلوبين.

ب- أسباب نسبية:
وفيه لا يتأثر اي عنصر من مكونات الدم إنما الذي ينقص هو البلازما في الدم وبالتالي يزداد مقدار الهيماتكوريت ..(PCV).

* ونقصان هذه الكريات عن المعدل الطبيعي مؤشر لمرض فقر الدم.. Anaemia

وهناك انواع كثيرة لمرض فقر الدم ولايتسع المقام لذكرها وذكر أسبابها.

2- عدد خلايا الدم البيضاء.. WBC .. White Blood Cells

زيادة عدد كريات الدم البيضاء تسمى بـ Leucocytosis
انخفاض عدد كريات الدم البيضاء يسمى بـ Leucopenia

3- الصفائح الدموية.. Blood Platelets ..PLT

* زيادة عدد الصفائح الدموية تعرف بـ Thrombocytosis

تحدث هذه الزيادة نتيجة الإصابة ببعض الامراض مثل:

1- فقر الدم الناتج عن نقص الحديد .. Iron Deficiency Anaemia
2- فقر الدم الإنحلالي .. Haemolytic Anaemia
3- مرض الدرن T.B... Mycobacterium Tuberculosis
4- مرض زيادة انتاج كريات الدم الحمراء .. Polycythaemia
5- بعد استئصال الرئة أو بعد اجراء العمليات الجراحية أو بعد عملية ازالة الطحال.
6- أحيانا تكون الزيادة فسيولوجية مثل السكن في المرتفعات أو الجهد الكبير.

* انخفاض عدد الصفاح الدموية يعرف بـ thrombocytopenia

- هذا النقص في عدد الصفائح الدموية يسبب القابلية للنزف ويحدث هذا النقص نتيجة لعدد من الاسباب أهمها:

1-أسباب أولية أو مايسمى ... Idiopathic thromcocytopenia Pupura I.T.P وهي أسباب غير معروفة.
2- ثانوي وهذا ناتج عن الاصابة ببعض الامراض مثل ( العدوى المزمنة/السرطان/التضخم في الطحال/امراض الكبد/ تناول بعض الادوية التي تثبط نشاط النخاع العظمي..ألخ)
3-أسباب اخرى مثل ( الاطفال حديثي الولادة/عدم تناول كميات كافية من العناصر الهامة في تصنيع الدم مثل فيتامين B12 وحامض الفوليك Folic acid

4- قياس تركيز الهيموجلوبين Hb:

الزيادة أو النقصان في تركيز الهيموجلوبين يسجل علامة أو مؤشر لوجود مرض يحتاج إلى فحصوات أكثر.

* يحدث انخفاض للهيموجلوبين عن المعدل الطبيعي في (حالات فقر الدم المتعددة Anaemia / اثناء فترة الحمل).

* الزيادة في تركيز الهيموجلوبين عن المعدل الطبيعي تحدث في حالة مرض احمرار الدم (الزياد في عدد كريات الدم الحمراء Polycythaemia ).

5- قياس نسبة الهيماتوكريت PCV .. Packed Cell Volume /Haematocrit .. HCT

- وهو عبارة عن حجم كمية من كريات الدم الحمراء بعد عملية الطرد المركزي لها معبراً عنه بالنسبة المئوية لحجم الدم الكلي , ويعتبر الهيماتوكريت ليس مكون من مكونات الدم مثل كريات الدم الحمراء أو الهيموجلوبين.
- للهيماتوكريت علاقة كبيرة بنتائج كريات الدم الحمراء والهيموجلوبين.
- قيمة الهيماتوكريت تستعمل أيضاً في تحديد بعض مؤشرات كريات الدم الحمراء مثل (MCV / MCHC).

* زيادة معدل الهيماتوكريت مؤشر على كل من:
1- احمرار الدم .. Polycythaemia.
2- امراض القلب .. Heart disease / وأمراض الرئة .. Lung disease.
3- حالات الجفاف Dehyadration.
4- حالات الحروق .. Burns.

* انخفاض معدل الهيماتوكريت مؤشر على (فقر الدم / الحمل / سرطان الدم ).

6- متوسط وزن هيموجلوبين كرية الدم الحمراء Mean Corpuscular Haemoglobin .. MCH:

- يعبر الـ MCH عن معدل وزن (كمية) الهيموجلوبين في كرية الدم الحمراء وهو مهم في تشخيص بعض انواع فقر الدم.

* نقصان قيمة الـMCH يعني نقصان كمية الهيموجلوبين في الكرية.

7- متوسط تركيز الهيموجلوبين في كريات الدم الحمراء .. Mean Corpuscular Haemoglobin concentration ..MCHC:

- يعبر الـ MCHC عن معدل نسبة تركيز الهيموجلوبين في كريات الدم الحمراء.
- يساعد الـ MCHC في تشخيص انواع فقر الدم المختلفة.

* نقص تركيز الـ MCHC يعرف بـ Hypochromia ونجده في فقر الدم الناتج عن نقص في الحديد Iron deficiency anaemia.

8- متوسط حجم الكرية Mean Cell Volume .. MCV:

- نقصان متوسط حجم الكرية MCV يعني أن حجم الكرية الحمراء أصغر من الحجم الطبيعي.

- في هذه الحالة تعرف الكرية بـ Microcyte ونجد هذا النوع من الحجم في:
1- فقر الدم بنقص الحديد Iron deficiency anaemia.
2- أنيميا البحر الأبيض المتوسط Thalassemia.

- زيادة متوسط حجم الكرية MCV يعني أن حجم الكرية الحمراء أكبر من الحجم الطبيعي.
- في هذه الحالة تعرف الكرية بـ Macrocyte أو انيميا الكرات الحمرا المتضخمةMegaloblastic anaemia.

- نجد هذا النوع في فقر الدم الناتج عن الامراض التالية:
1- نقص حامض الفوليك .. Folate deficiency.
2- نقص فيتامين B12 ..B12 deficiency.

9- قياس متوسط حجم الصفائح الدموية Mean Platelet Volume .. MPV

10- قياس توزيع كريات الدم الحمراء Red Cell Distribution Width .. RDW

11- قياس توزيع الصفائح الدموية Platelet Distribution Width .. PWD

أما بالنسبة لخلايا الدم البيضاء التفريقية Differential Count فهي تنقسم إلى قسمين :
1- خلايا محببة Granulocytic Cells.
2- خلايا غير محببة AGranulocytes cells.

أولاً الخلايا المحببة :

أ - خلايا متعادلة Neutrophils:
* الزيادة في عدد الخلايا المتعادلة تسمى بـ Neutrophilia:
1- أسباب أو حالات غير مرضية (الاطفال حديثي الولادة / المجهود العضلي الشديد / أثناء الشهور الأخيرة من الحمل / التوتر العصبي).

2- أسباب أو حالات مرضية مثل:
- حالات التسمم (تسمم داخلي مثل البولينا/تسمم خارجي بالرصاص او الكورتيزون او اول اكسيد الكربون).
- العدوى العامة مثل الدفتيريا والالتهاب الرئوي.
- الاورام السرطانية , وسرطان الدم الابيض غير الليمفاوي.
- التهاب اللوز والتهاب الزائدة الدودية.
- النزيف الشديد.

* الانخفاض في عدد الخلايا المتعادلة يسمى بـ Neutropenia:
- العدوى بالامراض الفيروسية مثل الحصبة والانفلونزا.
- الحمى التيفودية Typhoid fever / الحمى المالطية Brucellosis.
- مرض الدرن المتسبب عن البكتريا.
- فقر الدم الناتج عن نقص فيتامين B12 ونقص حامض الفوليك.
- هبوط في نشاط النخاع العظمي بسبب التعرض للإشعاع أو الاصابة بالأورام المتعددة.
- السموم التي تؤدي إلى هبوط في النخاع العظمي مثل الزرنيخ وأدوية السلفا , البنزين.
- الأدوية وهي السبب في معظم الحالات ومن أشهر هذه الأدوية مايلي :
مضاد الغدة الدرقية / مضاد الصرع / مضاد السكري / مضاد التخثر / مضادة الهستامين / مضادة الملاريا / مضادة الدرن / وبعض من المضادات الحيوية.

ب- الخلايا الحامضية Eosinophils:

* الزيادة في عدد الخلايا الحامضية يعرف بـ Eosinophila:
- الأصابة بالطفيليات مثل البلهارسيا, والانكلستوما, والملاريا.
- الأمراض الجلدية مثل الاكزيما والصدفية والجرب وغيره.
- أمراض الحساسية مثل الربو الشعبي.
- سرطان الدم غير الليمفاوي المزمن.
- تعاطي بعض الادوية مثل البنسلين.
- الأورام الخبيثة.

* الانخفاض في عدد الخلايا الحامضية يعرف بـ Eosinopenia:
- حالات الضغوط Stress / الصدمة Shock / والحروق Burns.
- تناول علاج الكورتيزون.
- بعد العمليات الجراحية.

ج- الخلايا القاعدية Basophils:

* الزيادة في عدد الخلايا القاعدية يعرف بـ Basophilia:
- سرطان الدم الأبيض المزمن.
- هبوط نشاط الغدة الدرقية.
- بعد عملية استئصال الطحال.

* الانخفاض في عدد الخلايا القاعدية يعرف بـ Basopenia:
- زيادة نشاط الغدة الدرقية.
- الالتهابات الحادة.
- العلاج بالكورتيزون.

ثانياً: الخلايا الغير محببة:

أ- الخلايا الليمفاوية Lymphocytes:

* الزيادة في عدد خلايا الدم البيضاء الليمفاوية تعرف بـ Lymphocytosis:
- بعض حالات العدوى عند الأطفال مثل الحصبة والانفلونزا والسعال الديكي.
- الحمى التيفودية والحمى والمالطية.
- التهاب الكبد الفيروسي Viral hepatitis.
- التهاب الغدد الليمفاوية.
- سرطان الدم الليمفاوي.

* الانخفاض في عدد خلايا الدم البيضاء الليمفاوية يعرف بـ Lymphocytopenia:
- تناول بعض الأدوية مثل مضادات السرطان.
- حالات التسمم بالبولينا الحاد أو المزمن.
- تناول علاج الكورتيزون.
- التعرض للإشعاع.

ب- الخلايا وحيدة النواة Monocytes:

* الزيادة في عدد الخلايا وحيدة النوة يعرف بـ Monocytosis:
- العدوى بالبكتريا مثل بكتريا الدرن T.B أو التيفويد او الحمى المالطية.
- الإصابة بالطفيليات وحيدة النواة مثل الملاريا Malaria.
- الالتهابات وتقرح القولون المزمن.
- بعض الأورام.

* الانخفاض في عدد الخلايا وحيدة النواة يعرف بـ Monocytopenia:
- نقص فيتامين B12 وحمض الفوليك.
- سرطان الدم Leukemia.
- تليف النخاع العظمي Aplastic anaemia.

20/08/2015

الصفائح الدموية.. Blood Platelets ..PLT

* زيادة عدد الصفائح الدموية تعرف بـ Thrombocytosis

تحدث هذه الزيادة نتيجة الإصابة ببعض الامراض مثل:

1- فقر الدم الناتج عن نقص الحديد .. Iron Deficiency Anaemia
2- فقر الدم الإنحلالي .. Haemolytic Anaemia
3- مرض الدرن T.B... Mycobacterium Tuberculosis
4- مرض زيادة انتاج كريات الدم الحمراء .. Polycythaemia
5- بعد استئصال الرئة أو بعد اجراء العمليات الجراحية أو بعد عملية ازالة الطحال.
6- أحيانا تكون الزيادة فسيولوجية مثل السكن في المرتفعات أو الجهد الكبير.

* انخفاض عدد الصفاح الدموية يعرف بـ thrombocytopenia

- هذا النقص في عدد الصفائح الدموية يسبب القابلية للنزف ويحدث هذا النقص نتيجة لعدد من الاسباب أهمها:

1-أسباب أولية أو مايسمى ... Idiopathic thromcocytopenia Pupura I.T.P وهي أسباب غير معروفة.
2- ثانوي وهذا ناتج عن الاصابة ببعض الامراض مثل ( العدوى المزمنة/السرطان/التضخم في الطحال/امراض الكبد/ تناول بعض الادوية التي تثبط نشاط النخاع العظمي..ألخ)
3-أسباب اخرى مثل ( الاطفال حديثي الولادة/عدم تناول كميات كافية من العناصر الهامة في تصنيع الدم مثل فيتامين B12 وحامض الفوليك Folic acid

19/08/2015

العد الكلي لكريات الدم البيضاء : Total Leucocytic Counting

بواسطة المجهر وشريحة العد Haemocytometer
محلول التخفيف يحلل كريات الدم الحمراء ويصبغ انويه كريات الدم البيضاء بلون بنفسجي فيسهل عدها.

كيفية العمل :

1- يخفف الدم 2:1 باستخدام الماصة ذات الانتفاخ المدرجة 0.5 ، 1 ، 11 بملئها بالدم حتى علامة 0.5 ثم بالمحلول حتى علامة 11.

2- يمكن عمل نفس التخفيف 20 ميكروليتر إلى 0.38 مل من المحلول ( باستعمال الماصة الأوتوماتيكية ) في أنبوبة زجاجية.

3- ترج الأنبوبة جيدا.

4- تملا شريحة العد بواسطة ماصة باستير بعد وضع غطاء زجاجي للشريحة.

5- تعد كريات الدم البيضاء في المربعات الأربعة الخارجــــية باستخدام العدسة الشيئية ( *10) للمجهر.

الحساب :

عدد كريات الدم البيضاء /مم3 :
عدد الكريات * 100/2 = عدد الكريات * 50

الأخطاء التي تؤدي إلى زيادة أو نقص عدد كريات الدم البيضاء :
نفس الأسباب التي تم ذكرها عند عد كريات الدم الحمراء . لتلافي هذه الأخطاء يمكن عد عينه أخري أو عدد أكبر من الكريات البيضاء.
أسباب الزيادة في عدد كريات الدم البيضاء:
1. زيادة فسيولوجية أثناء الحمل والولادة ، عقب مجهود عضلي وفي الأطفــال حديثي الولادة (18000 – 25000/مم3).

2. زيادة مرضية – العدوي بالميكروبات العنقودية والسبحية مثل التهاب اللوزتين والزائدة الدودية والتهاب حوض الكلي – الدرن.

أمراض الحساسية والجلدية والطفيليات.
العدوي بالفيروسات.
الأورام الخبيثة وسرطان الدم.
أسباب النقص في عدد كريات الدم البيضاء:
العدوي ببعض الفيروسات.
فشل النخاع العظمي.
التيفود والباراتيفود.
المعدل المرجعي :

الفئة النسبة / مم 3

البالغين 4000 – 11.000 / مم3

أطفال( عام ) 6000 – 18.000 / مم3

أطفال (4 – 7 أعوام) 5000 – 15.000 / مم3

أطفال (8 – 12 عام) 4.500 – 13.500 / مم3

16/08/2015

العد الكلي لكرات الدم الحمراء R.B.Cs Counting

العد بواسطة المجهر وشريحة العد Haemocytometer كيفية العمل :

1. يخفف الدم 200:1 في محلول التخفيف وذلك بإضافة 20 ميكروليتير دم إلى 4 مل محلول في أنبوبة وازمـــان ( يمكن اخذ العينة بواسطة الماصـــة ذات الانتفاخ والمقسمة 0.5 – 1 – 101 وذلك بسحب الدم حتى 0.5 ثم التكملة حتى 101 بمحلول التخفيف).

2. ترج الأنبوبة جيدا لمدة دقيقتين علي الأقل ( أو الماصة ).

3 . تملا شريحة العد بماصة شعرية أو ماصة باستير بعد وضع غطاء الشريحة.

4. تعد كريات الدم الحمراء بواسطة العدسة الشيئية X 10 أو X40 علي أن يدخل في العد الكريات التي تمس القاع والحدود الشمالية للمربعات الصغيرة في 5 مربعات من المربع الأوسط للشريحة ( المربعات الأربعة علي الأطراف + المربع الأوسط ).

طريقة العد :خمس مربعات من المربع الأوسط في شريحة العد .

الحساب :

عدد كريات الدم الحمراء /مم3 = عدد الكريات * 10000

أسباب الزيادة في عدد كريات الدم الحمراء :

نقص الأكسجين – أمراض القلب وامراض تليف الرئتين ووجود بعض أنواع الهيموجلوبين غير الطبيعي.

أ- أخطاء تؤدي إلى زيادة العدد .

1-حجم الدم اكثر من 20 ميكروليتر أو حجم المحلول اقل من الحجم المطلوب.

2. عدم مزج العينة جيدا مع محلول التخفيف.

3. توزيع كريات الدم الحمراء في شريحة العد غير متوازن.

4. مل خاطئ لشريحة العد.

5. عد جميع كريات الدم الحمراء الملامسة للخطوط الجانبية.

أسباب نقص كريات الدم الحمراء :
أمراض الدم مثل اللوكيميا وفشل النخاع العظمي .... الخ

ب- أخطاء تؤدي إلى نقص العدد:
1. حجم الدم اقل من 20 ميكروليتر أو حجم المحلول اكثر من الحجم المطلوب.

2. إرجاء العد لمدة طويلة.

3. وجود جلطة صغيرة في العينة.

4. وجود فراغات هوائية أو شوائب.

5. استعمال شريحة غير نظيفة.

المعدل المرجعي :

الفئة النسبة – ملليمتر المكعب

الرجال 4.5 –6.5 مليون / ملليمتر المكعب

النساء 3.8 – 5.8مليون / ملليمتر المكعب

أطفال (3 شهور) 3.2– 4.8 مليون / ملليمتر المكعب

أطفال( 3 – 6 أعوام) 4.1– 5.5 مليون / ملليمتر المكعب

أطفال (10 – 12 عام) 4 – 5.4 مليون / ملليمتر المكعب

16/08/2015

تقدير نسبه الهيموجلوبين في الدم

أ‌- طريقة جهاز ساهلي :
تعتمد هذه الطريقة علي مقارنة الألوان وفيها يتحول الهيموجلوبين بواسطة حمض الهيدروكلوريك إلى هيماتين حمضي ويتكون هذا الجهاز من ثلاثة أنابيب – اثنتان ملونتان والثالثة( التي توجد بالمنتصف ) تستعمل لأجراء الاختبار وهذه مدرجه لكي تعطي قراؤة الهيموجلوبين بطريقتين :
اما بالنسبة المئوية (%) أو بالجرام ( جم)

كيفية العمل :

1. يؤخذ دم من الإصبع بواسطة ماصة الهيموجلوبين حتى العلامة (0.02 ملل] ).

2. تمسح الماصة من الخارج حتى لا يعلق بها أي دم زائد.

3. توضع هذه الكمية من الدم في أنبوبة جهاز ساهلي موضوع بها حمض هيدروكلوريك مخفف (1/10 ع يد كل) حتى العلامة 20%.

4. ترج الأنبوبـة جيدا وتترك لمدة 10 دقائق حتى يتحول الهيموجلوبين إلى أحد مشتقاته الملونة.

5. لاحظ اللون بعد ذلك: لو كان الناتج اغمق من لون الأنابيب الأخري ضع بواسطة ماصة باستير حمض يد كل المخفف بالتدريج نقطة نقطة حتى يصبح اللون مماثلا في الأنابيب الثلاثة.

6. اكتب قراءة الهيموجلوبين بواسطة التدريجيين الموجودين علي الأنبوبة ( جم%) وبالنسبة المئوية.

ب- تقدير الهيموجلوبين بطريقة الدرابكن : Drabkin Method

تقدر كمية الهيموجلوبين بقياس اللون الناتج عن اتحاده بالسيانيد بجهاز قياس الطيف الضوئي (Spectrophotometer )

ويجب ان يكون لون محلول التخفيف اصفر باهتا رائقا يعطي درجة امتصاص صفر عند قراءته علي جهاز القياس الطيفي عند طول موجي 540 نانوميتر باستعمال الماء المقطر (Blank)

تنتج الشركات كاشف لتقدير الهيموجلوبين بطريقة السيانيد يتم تخفيفه باتباع إرشادات الشركة المنتجة.

يحفظ محلول التخفيف في زجاجة بنية اللون لعدة شهور في درجة حرارة الغرفة.

كيفية العمل :

1. يوضع 5 مل محلول درا بكين + 20 ميكروليتر (20ul) دم باستخدام ماصة أوتوماتيكية ( أو ماصة الهيموجلوبين ) .

2. ترج الأنبوبة تم تترك لمدة 3 – 5 دقائق حتي يتم التفاعل .

3. يقرا علي طول موجي 540 نانوميتر بعد ضبط صفر الجهاز باستخدام محلول درابكين .

4. تقرأ عينة قياسية (Standard) علي الجهاز الحساب : درجة امتصاص الاختبار X تركيز المحلول القياسي X معامل التخفيف
درجة امتصاص القياسي 100 = تركيز الهيموجلوبين _ بالجرام / 100 مليلتر ) .

16/08/2015

في المختبرات الطبية يتم استخدام أنواع من أنابيب الدم Types of blood tubes تختلف بمحتوى المواد الموجودة بداخلها حسب التحليل المطلوب والأنواع الأشهر هي
1. الأنبوب الأحمر Red Tube :
أنبوب جاف تماماً لا يحتوي على أي موانع تجلط وذلك من أجل الحصول على السيرم Serum وهو يستخدم في الغالب في تحاليل كيمياء الدم و المصليات و الهرمونات و بعض التحاليل الأخرى ، حالياً يوجد أنبوب أصفر yellow tube لا يحتوي على أي موانع تجلط ولكن نجد بداخلة مادة جل وهي تساعد في فصل السيرم Serum عن كريات الدم Blood Cells ، يفضل عدم فصل العينة إلا بعد تجلد الدم داخل الأنبوب وذلك من أجل عدم تكون جلطة داخل الأنبوب عند فصل العينة .
2. الأنبوب الأخضر Green Tube :
يحتوي هذا الأنبوب على مادة مانعة لتجلط وهي Lithium Heparin تختصر باسم (LH) وتستخدم بتركيز قليل من أجل عمل وظيفة منع التجلط ولا تؤثر على التفاعلات الكيميائية ولكن في الفترة الحالية يتم استبداله بالأنبوب الأحمر أو الأصفر .
3. الأنبوب البنفسجي Lavender Tube :
يحتوي على مادة مانعة لتجلط تسمى Ethylene Diamine Tetraacetate تختصر بإسم (EDTA) من نوع EDTA K2 أو EDTA K3 وهو يستخدم في مجموعة مختلفة لتحليل الدم مثل صورة الدم CBC و تحليل فصائل الدم Blood Group وغيرها .
4. الأنبوب الأزرق Blue Tube :
يحتوي على مادة سترات الصوديم Sodium Citrate من أجل الحصول على البلازما وذلك لقياس عوامل تجلط الدم Coagulation Factors ومن أهمها و الشائع في المستشفيات Prothrombin (PT) وذلك Activated Partial Thromboplastin يختصر باسم (aPTT) لابد من أخذ عينة دم المريض بكمية محددة وتوضح الإشارة على الأنبوب لدلالة على مستوى الدم المطلوب لإجراء الاختبار .
5. الأنبوب الرمادي Grey Tube :
يحتوي على مادة Fluoride Oxalate أو Potassium Oxalate و Sodium Fluoride وذلك لعمل قياس الجلوكوز في الدم لإنه يمنع تحلل الجلوكوز مع العلم إنه يؤثر على خلايا لذلك لا يستخدم في التحاليل الدموية و ترسل عينة قياس الجلوكوز إلى قسم كيمياء الدم .

6. الأنبوب الأسود Black Tube :
يحتوي على مادة Buffer Sodium Citrate وذلك لاستخدامه في تحليل ESR في قسم صورة الدم .
هناك أشكال للأغطية وطريقة فتحها ومقاسات وخاصة الأنبوب البنفسجي يحث يستخدم أنبوب صغير يحتوي على نفس مادة EDTA للأطفال حديثي الولادة