29/11/2025
بسم الله الرحمن الرحيم
🟥سلسلة اساسيات الجودة ببنك الدم المركزي(7)
👍بقلم د/ محمدالنور طه
🟢الجودة بقسم التجانس
(Cross matching )
🔸هذا القسم من الأقسام المهمة وهو آخر مرحلة ومنها ينقل الدم للمريض لمنع أي مضاعفات خطيرة أو حتى مميتة قد تحصل للمريض والتأكد من أن المريض سوف يستفيد من نقل الدم
مع العلم أن فحص التوافق لا يمنع بأي حال من الأحوال تكون أجسام مضادة ضد الانتيجينات الأخرى التي لا تفحص بصورة روتينية في فحص التوافق مثل K انتيجين و Fyaوغيرها
🔸فيجب في هذا القسم الاهتمام بمعايير الجودة مما يتطلب التطوير الفعال والحفاظ على معايير مُرضية في اختبارات ما قبل نقل الدم اتباع نهج منظم في اعتماد نظام الجودة،قد تؤدي الأخطاء الفنية والأخطاء الكتابية واستخدام تقنيات أو معدات غير معتمدة وعدم الامتثال للإجراءات المعمول بها إلى عدم التوافق وتفاعلات انحلالية فورية أو متأخرة في نقل الدم
🔸فيجب عمل كل مايجب عمله وتصحيح كل الأخطاء التي قد تحدث ابتداءا من قسم التبرع الي ان تصل لقسم التجانس
🟢إجراءات ما قبل نقل الدم في بنك الدم:
🩸 مراجعة سجلات بنك الدم الخاصة باختبارات العينات السابقة للمستفيدين.
🩸 تجميع فصائل الدم ABO، ونمط Rh، وفحص الأجسام المضادة غير المتوقعة على كل عينة متلقية(المستقبل) و يتم إرسالها لاختبار التوافق.
🩸 تحديد فصيلة الدم ABO، وتحديد نوع Rh، وفحص الأجسام المضادة غير المتوقعة في وحدة الدم.
🟢ضبط جودة قسم التجانس cross matching في
👍ضبط جودة المحاليل والأجهزة
👍ضبط جودة عينات المرضى للتجانس
👍ضبط جودة وحدة دم المتبرع
👍ضبط جودة طرق تحضير الدم
👍ضبط جودة الكوادر العاملة
👍ضبط جودة المحاليل والأجهزة
🩸مراقبة الجودة في المحاليل:
🔸مراقبة جودة محاليل فصائل الدم تعتبر أمرًا حيويًا لضمان دقة تحديد فصيلة الدم وتقليل المخاطر المرتبطة بنقل الدم غير المتوافق.
🔸 يتم التحقق من صلاحية المحاليل وتاريخ انتهاء الصلاحية، والتأكد من أنها مخزنة بشكل صحيح.
🔸 يتم إجراء اختبارات دورية للمحاليل لضمان دقتها وفعاليتها في تحديد فصائل الدم.
🔸 يتم التحقق من صلاحية المحاليل وتاريخ انتهاء الصلاحية، والتأكد من أنها مخزنة بشكل صحيح.
🩸المصل (السيرم): يجب التأكد من صلاحية المصل المستخدم في تحضير الدم للمريض، والتأكد من أنه لا يحتوي على أي أجسام مضادة تعمل في درجة حرارة الغرفة.
🩸الألبومين: يجب استخدام الألبومين 22% Bovine Albumin، وهو محلول يستخدم في خطوة الحضانة لزيادة حساسية الكشف عن الأجسام المضادة التي تعمل على درجة حرارة الجسم.
🩸الكواشف الأخرى: التأكد من صلاحية أي كواشف أخرى تُستخدم، مثل كواشف اختبار كومبس (Coombs) من ناحية اللون والعكر .
➖يجب استخدام positive وnegative control بالنسبة لمحاليل ABO وRh في كل بداية عمل للتأكد poten وspecific of reagent
➖ويجب وضع المحاليل في الثلاجة بعد الأنتهاء من العمل علي حسب درجة الحرارة الموضحة علي المحلول من الشركة المصنعة
عند استخراج المحاليل خارج الثلاجة للعمل توضع في درجة حرارة الغرفة ثم يجب عمل QC للمحاليل
🔸بالنسبة لمحاليل ABO وRh وخلايا الدم الحمراء يجب عمل الاتي:
🩸Quality Control of of ABO
(Anti- A,anti-B, anti_AB)
🔸Appearances no turbidity. Precipitate, particles or gel formation by visual inspection
🔸Specificity positive reaction with Red cells having corresponding antigen,and no reaction with negative control
🔸Avidity macroscopic agglutination with 50%red cells suspension in homologous serum/normal saline using the slide test
10 seconds for anti A,antiB,and antiAB with A1and/or B cells at RT,20 seconds with A2and A2B cells
🔸Reactivity no immune hemolysis, rouleaux formation or prozone
🔸potency undiluted serm should give +++ reactions in saline tube test using a 23% red cells suspension at RT titer should be 256 for anti A,antiB,antiAB with A1and/or B cells, 64 with A2 and A2B cells
وعمل
🩸Quality acceptable of Rh anti sera (anti D)
🔸Appearance no turbidity. Precipitate, particles or gel formation by visual inspection
🔸Specificity positive reaction with R1r cells/know D positive cells
🔸Avidity visible agglutination with 40% red cells suspension homologous serum using the slide test
🔸Reactivity no immune hemolysis, rouleaux formation or prozone
🔸Potency undiluted serum gives +++ reactions in designated test for each serum and atiter 32_64 for antiD
وعمل
🩸Quality Control of reagent red blood cells
🔸Appearance no hemolysis or turbidity supernatant by visual inspection
🔸Reactive and Specific positive reactions with known sera against red blood cells antigenes
🩸الأجهزة والمعدات
🔸جهاز الطرد المركزي (Centrifuge): يجب التأكد من أن جهاز الطرد المركزي يعمل بكفاءة، ويعمل بالسرعة المطلوبة (3000 دورة في الدقيقة) لمدة 15 ثانية.
🔸الحاضنة (Incubator) او الحمام المائي(water bath): يجب التحقق من أن الحاضنة تعمل بشكل صحيح عند درجة حرارة 37 درجة مئوية، لضمان الحضانة الكافية للخلايا.
👍ضبط جودة عينات المرضى
🔸تقنيات جمع العينات:
تعد تقنيات بزل الوريد المناسبة ومضادات التخثر المناسبة وحجم العينة المناسب أمرًا بالغ الأهمية. يمكن أن تؤدي الانحرافات إلى انحلال الدم، مما يؤثر على نتائج الاختبار ويحتمل أن يسبب تفاعلات نقل الدم.
🔸النقل والتخزين: يجب نقل عينات الدم على الفور إلى المختبر وتخزينها في ظل الظروف المثالية. يمكن أن تؤدي تقلبات درجة الحرارة أو التأخير إلى الإضرار بسلامة العينة.
🔸تُعدّ عينات EDTA (البلازما) الأنسب للاستخدام في الجل (Gel)
بينما تبقى العينات المتجلطة(plain) (المصل) مناسبة للاستخدام في التحضير اليدوي.
🔸لابد من إحضار نوعين من العينات عينة في EDTA وعينة اخري في plain لقسم التجانس لكل مريض
🔸يجب كتابة الاسم واضح علي العينة والفصيلة مطابقة للطلب التجانس
🔸يجب أن تكون كمية العينة كافية
🔸يجب أن تكون العينة مأخوذة حديثا من المريض
🔸يجب تجنب عينات المرضى المتحللة لأنها قد تسبب تحلل خلايا الدم الحمراء للمتبرع
🔸لابد من إرفاق طلب تحضير مفصل مكتمل
➖ باسم المريض رباعي
وعمر المريض وجنس المريض
➖والمستشفي والوحدة وتاريخ الطلب
➖يجب كتابة تاريخ وزمن سحب العينة من المريض
➖وتحديد وقت نقل الدم للمريض
➖والتاريخ المرضي للمريض
➖وتوضيح سبب نقل الدم
➖وتوضيح نوع وعدد مشتق الدم الذي يحتاجة المريض
➖نوع حالة نقل الدم هل طارئ ام مبرمج لعمل عملية جراحية مع توضيح سبب نقل الدم
➖ تسجيل عدد وزمن وحدات الدم التي تم نقلها سابقا
➖توضيح أسباب تفاعلات تحسسية سابقة للمريض بسبب نقل الدم
➖لابد ان يحتوي فورم الطلب علي اسم الطبيب وتوقيعه وان يكون مختوم من إدارة المستشفي
لابد أن تسلم العينات وطلب التحضير بواسطة كادر طبي يتبع للمستشفي
➖إذا كان المريض طفل عمره أقل من اربعة أشهر لابد أن ترفق مع عينة الطفل عينة من دم الأم.
❌و يمنع نهائيا إستلام اي عينات وطلب تحضير من المرافقين
➖بعد الاستلام يجب علي الكادر المستلم تسجيل زمن الإستلام واسم الكادر الذي استلم منه ورقم تلفونه للتواصل وتحديد زمن التسليم
❌ترفض العينات الغير مستوفية الشروط وفورم الطلب الغير مكتمل
👍ضبط جودة وحدة دم (كيس دم) المتبرع
عند سحب وحدة دم المتبرع يجب عمل:
🔸مراجعة وحدة الدم (كيس الدم ) في دفتر نتائج الفيروسات للتأكد من خلوها من الأمراض المنقولة بالدم
🔸يجب أن تكون الوحدة (كيس الدم)خالية من تحلل الدم (hemolysis)
🔸وان تكون خالية من وجود التجلطات (clots) أو وجود أي تغيرات في شكل الدم بالوحدة
🔸يجب أن تكون مغلقة بواسطة جهاز الكاوية (sealar) أي وحدة دم (كيس الدم )مفتوحة مربوطة (عقدة)( open system ) أو فيها تسريب لايتم تحضيرها نهائيًا
🔸أي وحدة دم (كيس الدم )خارج الثلاجة لفترة طويلة لا تحضر لأن درجة الحرارة تنشط نمو البكتريا
🔸يجب عمل فحص فصائل ABO وRh لوحدة الدم (كيس الدم ) للتأكد من مطابقة الفصيلة للوحدة
🔸 يجب أخذ العينة من الوحدة (كيس الدم) عن طريق قطع الأنبوب(tube) (السير)بواسطة الكاوية( sealar )
👍ضبط جودة طرق تحضير الدم للتجانس
🔸تحضير الدم من أهم الفحوصات في خدمات نقل الدم هنالك عدة طرق فأكثر طريقتين يتم العمل بهما الطريقة اليدوية وطريقة بطاقة جل
🟢اولا الطريقة اليدوية
🔸يجب مطابقة عينة المريض مع طلب نقل الدم منعا للخطأ
🔸تحديد فصيلة المريض والعامل الريسي
🔸ترقيم الأنابيب مع اسم المريض علي حسب الوحدات
🔸يلزم لعمل فحص التوافق عينة طازجة من سيرم المريض وكريات الدم الحمراء من المتبرع التي تخضع لعملية غسيل بالمحلول الملحي Saline ( على الأقل ثلاث مرات) ومن ثم يضاف إليها المحلول الملحي لتخفيفها لتصبح بنسبة 5% (suspension of RBCs 5%)
❌ولا يجوز استعمال كريات الدم الحمراء مباشرة بدون تخفيفها أو غسلها.
🔺عملية الغسل بالمحلول الملحي تفيد في :-
✅
🔸يتضمن فحص التوافق اليدوية(طريقةالأنبوب Tube Method) ثلاث مراحل رئيسية
➖مرحلة المحلول الملحي لفحص الأجسام المضادة عند درجة حرارة الغرفة(cold Antibodies ) لكشف ABO والذي يحدث غالبا بسبب خطأ وايضا بعض الأجسام المضادة المؤثرة علي المحلول الملحي مثل( anti–M، anti–N، anti–S، anti–Lu، anti–F وanti–Le.)
➖ثم مرحلة الحضانةAlbumin) phase) عند درجة حرارة 37 درجة مئوية للكشف عن الأجسام المضادة ل IgG لعامل الريسي Rh
➖ثم مرحلة كومبس باستخدام مضاد الجلوبيولين (AHG) هو الإجراء الأهم والأكثر استخداما في بنوك الدم يعتبر اختبار التوافق غير مكتمل مالم تدرج تقنية مضاد الجلوبولين كجزء من الاختبار لأن معظم الأجسام المضادة التي تسبب مشاكل في نقل الدم لايمكن اكتشافها الا من خلال هذا الاختبار
🔸يستخدم Bovine Albumin 22% لتغليف خلايا الدم الحمراء فيعمل على زيادة ثبات العزل الكهربائي للوسط مما يسمح باظهار أجسام مضادة لIgG
🔸يستخدم محلول LISS فيعمل على تقليل من نسبة التنافر بين كريات الدم الحمراء(سالبةالشحنة)
يجب استخدام Coombs check cells هي عبارة عن خلايا O محسسة Sensitized بالأجسام المضادة Anti-D التي يجب أن تعطي تخثر(نتيجةايجابية) لتأكيد أن محلول AHG قد أضيف وأن غسل الخلايا قد تم على ما يرام اما إذا اعطي نتيجة تأكيدية سلبية فهذا يعني أن فحص التوافق غير صحيح Invalid وفي هذه الحالة يجب إعادة فحص التوافق مرة أخرى للتأكد من صحة النتيجة السلبية لفحص التوافق ويمكن الخطأ أن يكون من
ان عملية غسل الخلايا في المرحلة الأخيرة غير كافية وبالتالي فان بقايا السيرم أدت إلى إبطال مفعول جمحلول AHG
أن محلول AHG لم يضف إلى الأنبوب أصلا
أن محلول AHG لا يعمل أصلا قبل إضافته إلى الخلايا
🔸يتم الكشف عن الأجسام المضادة للمريض antibody screening
➖عن طريق اختبار مضاد الجلوبولين غير المباشر (IAT) في هذا الاختبار تخلط بلازما المريض مع نوعين من كريات الدم الحمراء من النوع o علي الأقل
screening cells(collectedfromgroupO, someofthemRhDpositive, someRhDnegative)
(ويفضل اربع كريات دم حمراء) متوفرة تجاريا وهنا الخلايا دي مستخدمة لأنها ما فيها B orA antigenes يعني فيها فقط انتيجينات باقي other blood groups زي Duffy, Lewis, kell يعني المريض لو تم نقل دم له من قبل اكيد جسمه المناعي يستجيب بانتاج أجسام مضادة ضد هذه الانتيجينات
نعمل Incubation لو طلع إيجابي
يجب عمل Ab identification
➖أو عن طريق استخدام عشرة خلايا كلهم من الفصيلة O panel cells
وبكون معاها panel sheet
ونعمل incubation في نفس الظروف اللي اتفاعل فيها Ab في فحص الscreening ولما نعرف الantibody
نتأكد انه المتبرع يكون negative لهذا الانتيجين ونعمل cross matching
🔸نعمل patient control وهي
يحضر أنبوب واحد One Tube للكنترول control لعينة المريض
يضاف 2قطرة من سيرم المريض Patient Serum
يضاف إلى الأنبوبين قطرتين drops 2 من معلق خلايا المريض Patient Cells suspension
ثم تضاف قطرتين drops 2 من Bovine Albumin
غسل Washing الانبوب ثلاث مرات بال normal saline
ثم يضاف إليها Coombs
ثم يوضع بجهاز الطرد المركزي لمدة 10_15 ثانية فقطوذلك من أجل المزج نفحص تحت المجهر ليحدد هل المريض عنده مشاكل مناعية داخلية مثل بعض الأمراض المناعية أو بسبب كثرة نقل الدم سابقًا أو إصابات ميكروبية سابقة أدت إلى وجود الأجسام المضادة
🟢ثانيا طريقة الجل gel cards
🔸 للتأكد من
specificity and reactivity of the MTS Anti-IgG card
يوصى باختبار كل دفعة في كل يوم باستخدام عينات الأجسام المضادة الإيجابية والسلبية المعروفة مع الخلية الحمراء المناسبة.
🔸التفاعل يجب أن يكون موجودا مع العينة الإيجابية فقط.
❌ لا تقم بتجميد البطاقات أو تعريضها للحرارة الزائدة.
🔸 يُخزن الcards بشكل مستقيم عند درجة حرارة 2 إلى 25 درجة مئوية.
❌إذا لم يتم تخزين البطاقات cards في وضع مستقيم، قم بطرد البطاقات قبل الاستخدام.
❌ لا تستخدم البطاقاتcards التي تظهر عليها علامات الجفافdry.
🔸 يجب أن تظهر طبقة سائلة أعلى الجل في كل أنبوب صغير.
❌ لا تستخدم البطاقاتcards التي تظهر فيها الأنابيب الدقيقةmicrotubes تغيرًا في اللون أو فقاعات أو بلورات.
❌ لا تقم بإزالة الغطاء الرقيق من الأنابيب الدقيقة حتى تصبح جاهزة للاستخدام لان الجل يبدأ في الجفاف بعد الفتح مباشرة.
🔸 توصي الشركة المصنعة أنه بعد الطرد المركزي، ينبغي قراءة النتائج على الفور.
🔸 قد تتأثر النتائج بتجفيف الجل وانحلال الدم في الخلايا الحمراء وميل أنماط التفاعل بسبب التخزين في وضع غير مستقيم.
🔸طريقة العمل بصورة مبسطة
➖لابد من عمل ال label الصحيح علي حسب وحدة المتبرع وعينة المريض
➖تحضير الخلايا لوحدة المتبرع بنسبة 0.8% وأن لاتقل عن 0.6% ولا تتجاوز 1.0%.
، ثم يتم اضافة 50 ميكرولتر من خلايا الدم الحمراء المحضرة من وحدة دم المتبرع.
➖ثم يتم أضافة 25 ميكرولتر من مصل المريض أو البلازما إلى الأنبوب الدقيق الصحيح
ثم إدخاله في الحضانة في درجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ثم يوضع في جهاز الطردالمركزي لمدة 10 دقائق (25 دورة في الدقيقة )ثم تقرأ النتيجة مباشرة( إذا وجدت أجسام مضادة تتجمع الخلايا الحمراء المتكتلة في أعلي الأنبوب [غير مطابقة] اما إذا لم توجد أجسام مضادة تنزل الخلايا الحمراء الغير متكتلةفي قاع الأنبوب [مطابقة] ويتم تقيم درجة التكتل وتصنيفها من (0) الي( 4+) ال(0) في قاع الأنبوب وال(4+) في اعلي قمة في الأنبوب ثم بقية الدرجات علي حسب وجودها في المنطقة الواقعة بين القمة والقاع )
(هذا للتوضيح فيجب أتباع تعليمات الشركةالمصنعة)
🔸إذا ظهر خط من الخلايا الحمراء على جانب واحد ويشكل مظهر "J" بسبب وضع البطاقة بشكل غير صحيح في حامل البطاقة.
فيجب إعادة الاختبار.
🔸 قد تحدث نتائج إيجابية كاذبة في حالة وجود أجسام مضادة لمكونات المحلول الحافظة في المصل الذي تم اختباره
🔸 يمكن أن تحدث نتائج اختبار إيجابية أو سلبية كاذبة بسبب التلوث البكتيري لمواد الاختبار، أو عدم كفاية وقت الحضانة أو درجة الحرارة، أو التخزين غير السليم للمواد
🔸 قد تحدث نتائج إيجابية كاذبة في البطاقات الهلامية التي تظهر عليها علامات الجفاف
🔸 قد تكون النتائج الشاذة ناجمة عن المصل الطازج أو الفيبرين أو الجسيمات الموجودة في المصل أو البلازما، أو الخلايا الحمراء التي تلتصق بجوانب الأنبوب الصغير. إن استخدام بلازما EDTA سوف يقلل من المشكلة.
🔸 يجب إضافة معلق الخلايا الحمراء RBCS cells suspension قبل البلازما أو المصل لأن حجم معلق الخلايا الحمراء أكبر من حجم البلازما. قد يحدث خلط غير كاف إذا تمت إضافة الحجم الأصغر من البلازما أو المصل قبل معلق الخلايا الحمراء.
🔸 يجب إضافة البلازما أو المصل خلال 10-15 دقيقة من إضافة معلق الخلايا الحمراء إلى أنبوب التفاعل. أي خلايا حمراء تتلامس مع عمود الهلام قبل الطرد المركزي قد لا تتاح لها الفرصة للتلامس مع البلازما وقد تبدأ في الهجرة عبر الجل مما قد يعطي رد فعل أضعف بعد الطرد المركزي.
🔸يجب الالتزام بتعليمات الشركة المصنعة للاستخدام أمرًا بالغ الأهمية لأداء الاختبار
🟢بالنسبة للرضع بعمر 4 أشهر أو أقل،
🔸 يمكن استخدام دم الأم لإجراء اختبار ما قبل نقل الدم بشرط توافق فصائل الدم (ABO) للأم والرضيع، حيث إن أي أجسام مضادة لخلايا الدم الحمراء ذات دلالة سريرية موجودة في دورة دم الرضيع الدموية ستكون من الأم.
🔸يجب أن تكون مكونات الدم المختارة للنقل متوافقة مع أي فصائل دم (ABO) أو أي أجسام مضادة أخرى لخلايا الدم الحمراء موجودة في بلازما الأم أو الرضيع.
🔸لا تتطلب عمليات نقل الدم المتكررة خلال الأشهر الأربعة الأولى من عمر الرضيع إجراء اختبارات توافق إضافية إذا لم تكن هناك أجسام مضادة
🔸إذا كانت نتيجة فحص الأجسام المضادة إيجابية، فسيكون من الضروري إجراء اختبار ما قبل نقل الدم الكامل والتوافق المتبادل.
👍ضبط الجودة للكوادر العاملة بقسم التجانس:
🔸 ضبط الجودة للكوادر العاملة بقسم التجانس يعتبر أمرًا حيويًا لضمان دقة وسلامة عملية التجانس وتقليل المخاطر المرتبطة بنقل الدم.
🔸 توفير التدريب المستمر للكوادر العاملة على أحدث التقنيات والإجراءات في مجال التجانس.
🔸 إجراء تقييم دوري لأداء الكوادر العاملة لضمان التزامهم بالإجراءات المعتمدة.
🔸 اتباع البروتوكولات والإرشادات المعتمدة لضمان دقة وسلامة عملية التجانس.
🔸 التحقق من نتائج عملية التجانس لضمان دقتها وموثوقيتها.
🔸بإجراء ضبط جودة دقيق للكوادر العاملة بقسم التجانس، يمكن ضمان سلامة نقل الدم وزيادة ثقة المرضى والأطباء في خدمات بنك الدم.
د/محمدالنور طه
بنك الدم المركزي ام درمان
